Taw qhia Cov Ntsiab Cai Thiab Kev Siv Ntawm Cov Cheebtsam General Ntawm Spectrophotometer

Spectrophotometer yog siv dav hauv kev tshawb nrhiav kab mob roj ntsha, tshuaj lom neeg, chaw kuaj mob thiab ib puag ncig.
Spectrophotometry ntsuas ntau npaum li cas lub teeb tshuaj yuav nqus tau los ntawm kev nqaj mus rau ntawm lub teeb ci los ntawm cov qauv hauv lub tsom duab hluav taws xob.
Los ntawm ntsuas qhov ntsuas lub teeb pom, ntau txoj hauv kev tuaj yeem siv los txiav txim siab qhov siab ntawm solute hauv tus qauv.
Lub tswv yim ntawm Spectrophotometry
Cov nqaj tau xa mus rau cov qauv muaj cov duab photon nqaj.
Thaum cov photons ntsib cov lwg me me nyob hauv tus qauv, cov lwg me me tuaj yeem nqus tau qee qhov, txo cov photons hauv qhov nqaj thiab txo qhov kev siv ntawm cov teeb liab pom.
Txoj kev sib kis yog ib feem ntawm lub teeb uas dhau los ntawm tus qauv. Nws txhais tau tias kev siv lub zog mus dhau ntawm cov piv txwv ntawm qhov teeb meem sib zog.
Qhov kev nqus tau yog sib txawv nrog lub transmittance, sib phim rau tus nqi ntsuas los ntawm lub spectrophotometer.
Raws li kev nqus, qhov ntau ntawm cov qauv daws teeb meem tuaj yeem txiav txim siab los ntawm cov cai Lambert txoj cai, uas pom tau tias muaj kev sib txig sib luag ntawm cov kev nqus thiab cov qauv tshuaj. Raws li txoj cai npias Lambert, kev nqus tau yog qhov khoom ntawm nqus ntawm co, qhov ntsuas yog qhov ntsuas ntawm lub teeb ntawm lub teeb nqus los ntawm solute ntawm qhov muab yoj yoj thiab qhov sib nrug los ntawm kev sib kis. Qauv, lossis kev mus deb, thiab kev daws teeb meem. Feem ntau, lub hom phiaj ntawm kev ntsuas kev nqus yog ntsuas cov concentration ntawm cov qauv.
Cheebtsam ntawm spectrophotometer
Txhua lub spectrophotometer muaj qhov teeb meem, lub tshuab sib txuas (lub lens lossis lub cuab yeej tsom rau xa cov kab teeb muaj zog thiab ncaj), monochromator rau kev cais cov kab teeb ntawm cov wavelengths sib txawv, thiab ntev xaiv rau xaiv cov nthwv dej lossis qhov zawj ntawm cov yam xav tau. Lub nthwv dej ntawm lub teeb siv nyob rau hauv lub spectrophotometer hais hauv daim vis dis aus no yog nyob ntawm thaj tsam ntawm ultraviolet thiab pom lub teeb. Lub tshuab ntsuas hluav taws xob kuj tseem suav nrog tus qauv ntsuas lub cev, lub tshuab thaij duab thiab cov tshuaj ntsuam pom cov txiaj ntsig ntawm lub ntes.
Cov tsom iav hluav taws xob tshiab tshaj plaws tau ncaj qha rau hauv lub koos pij tawj, qhov twg sim ntsuas yuav tswj tau thiab cov txiaj ntsig tau tshwm sim.
Ua haujlwm txoj haujlwm ntawm spectrophotometer
Thaum nqa tawm cov spectrophotometry, nws yog ib qho tseem ceeb kom ceev faj kom tsim nyog, xws li hnav hnab looj tes, nyob ntawm seb cov tshuaj lom neeg lossis tshuaj siv uas koj siv.
Qhib lub cuab yeej thiab tso cai rau lub teeb thiab hluav taws xob kom sov ua ntej ntsuas UV-Vis spectrum ntawm tus qauv.
Npaj ib qho piv txwv ntawm cov kua tov nrog tib pH thiab lub zog ionic zoo sib xws, tab sis tsis muaj cov khoom yuav txheeb xyuas; vim tias cuvette thiab cov kuab tshuaj tuaj yeem ua rau lub teeb tawg, nws yog qhov tsim nyog los soj ntsuam qhov piv txwv.
Cov tsoos spectrophotometer coj qauv tuav yog tsim los tuav cov yas thiab quartz tais. Muab cov kua tshuaj ib txwm tso rau hauv lub tais.
Tom qab so tawm ntawm cov yiv tes tag thiab txaws lawv sab nraud ntawm lub tais, ntxig daim kab xev kom raug rau hauv tus qauv tuav thiab kaw lub hau qhov rooj.
Tsis txhob hnov ​​qab kaw qhov rooj vim hais tias UV hluav taws xob los ntawm kev qhib lub spectrophotometer tuaj yeem ua kev puas tsuaj rau koj lub qhov muag thiab tawv nqaij.
Ua haujlwm qhov xav tau ntev lossis nthwv dej ntu uas yuav kis mus rau tus qauv. Qhov no nyob ntawm lub yoj zoo tshaj uas cov tivthaiv raug txheeb xyuas tuaj yeem nqus tau. Lub tshuab tom qab ntawd yog xoom los ntawm kev ntsuas tus qauv dawb, uas rho tawm hauv qab nqus vim los ntawm tus qauv tsis.
Ua raws li hom kev sim tshuaj tsom spectrophotometry uas koj tab tom ua, nws yuav tsim nyog tsim kom muaj tus qauv kev nkhaus ua ntej kev ntsuas coj mus kuaj, ntawm qhov uas cov ntsiab lus ntawm cov sib txuas tshuaj ntsuam hauv qhov piv txwv tuaj yeem txiav txim tau.
Cia tus qauv kom ncav cuag qhov ntsuas kub kom zoo thiab sib tov maj mam kom tsis txhob qhia cov npuas. Tus qauv tuaj yeem ntxiv ncaj qha rau cov tais hauv lub tshuab thiab nyeem tau tuaj yeem ua.
Tom qab cov qauv tau ntsuas rau kev nqus, qhov kev sim yog xam tau zoo; Piv txwv, txhawm rau txiav txim siab lub zog lossis enzyme kev ua si qib.
Daim ntawv thov ntawm spectrophotometer
Ib qho ntawm cov khoom siv ntau ntawm spectrophotometer yog ntsuas ntsuas lub xov tooj ntawm lub cev. Kev ntsuas lub zog ntawm tes tuaj yeem siv los tsim cov logarithmic nkhaus kev loj hlob ntawm cov kab mob, los ntawm lub sijhawm zoo tshaj plaws rau kev sib koom ua ke ntawm cov protein ua ke tau txiav txim siab.
Lub spectrophotometer kuj tseem siv tau los ntsuas kev ntsuas cov tshuaj lom neeg tus nqi li cas. Hauv cov ntsiab lus no, qhov kev nqus tau siv los saib xyuas cov tshuaj tiv thaiv enzymatic, uas ploj nrog lub sijhawm los ntawm kev cuam tshuam ntawm 452nm. Tus nqi ntawm cov kauj ruam enzymatic no tuaj yeem suav los ntawm kev sib piv cov ntaub ntawv nrog cov kab zauv uas tsim nyog.
Kev taw qhia ntawm micro spectrophotometer tshem tawm qhov xav tau ntawm tus qauv nqa. Cov tsom iav hluav taws xob no siv sab nraub qhov chaw los khaws cov qauv.
Microspectrophotometer yog qhov kev xaiv zoo tshaj plaws los ntsuas qhov loj thiab qhov siab ntawm cov qauv me thiab kim, xws li biomolecules, suav nrog cov protein thiab nucleic acids.
Qhov kev nqus ntawm cov protein nyob ntawm 280nm nyob ntawm cov ntsiab lus ntawm cov ntxhiab tsw txuas ntxiv pom nyob rau hauv tryptophan, tyrosine thiab phenylalanine, nrog rau cov nyiaj disulfide ntawm ob cysteines.
Cov concentration ntawm cov protein tuaj yeem txiav txim siab los ntawm nws txoj kev nqus ntawm 280nm thiab nws cov coefficient, uas yog ua raws cov qauv ntawm cov amino acids.
DNA thiab RNA muaj qhov ntau tshaj qhov nqus tau ntawm 260nm, los ntawm qhov lawv cov peev xwm tau txiav txim siab tau. Qhov kev coj dawb huv ntawm nucleic acids kuj tseem tuaj yeem raug soj ntsuam los ntawm cov piv ntawm kev nqus khoom nyeem rau cov yoj yuag.